细胞实验|爱索达生物

1.1细胞增殖检测（EdU）服务

EdU（5-Ethynyl-2’- deoxyuridine）是一种胸腺嘧啶核苷类似物，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶（T）渗入正在复制的DNA分子中，通过基于EdU与Apollo荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性。

服务项目：细胞爬片或石蜡组织的细胞增殖检测；结果拍照。

服务流程：细胞爬片或石蜡组织切片；EdU检测；拍照；提交结果报告单。

客户提供：样品：组织或石蜡组织块；细胞爬片。

我司提供：凋亡检测载玻片；实验结果图片；实验报告单。

1.2细胞活力检测服务

MTT实验是检测细胞活力的实验方法，也常用来检测细胞的增殖情况。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。DMSO能够溶解沉积在细胞中的蓝紫色结晶物，溶液颜色深浅与所含有的甲瓒量成正比。再用酶标仪测定OD值，从而可以测定细胞的相对数和相对活力。

服务项目：细胞处理及细胞活力检测。

服务流程：细胞处理；细胞计数；MTT法测细胞相对数和相对活力；提交结果报告单。

客户提供：实验用细胞及处理条件。我司提供：原始数据；结果报告单。

1.3 流式细胞仪检测

流式细胞术（Flow Cytometry, FCM）是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段，它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数。利用Annexin V与PI，流式细胞仪可同时区分正常细胞、凋亡早期和凋亡晚期。流式还可用于分析细胞周期中各时期细胞的百分比。

服务项目：细胞周期；细胞凋亡。服务流程：细胞处理；流式检测细胞凋亡/周期；提交结果报告单。

客户提供：待检细胞。我司提供：流式图；结果报告单。

1.4 TUNEL 检测细胞凋亡

TUNEL是用来检测组织细胞在凋亡早期细胞核DNA断裂情况的。原理是荧光素标记的12- dUTP 在末端脱氧核苷转移酶（TdT）的作用下，连接到凋亡细胞中断裂的DNA的3’-OH末端。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA断裂，因而没有3’-OH形成，很少能够被染色。

服务项目：细胞：DAB显色或荧光检测；石蜡组织标本：切片，DAB显色或荧光检测；结果拍照。

服务流程：细胞爬片或者组织切片；Tunel检测；结果拍照；提交结果报告单。

客户提供：样品：组织、石蜡组织块或细胞爬片。

我司提供：结果图片；结果报告单。

1.5 Transwell 技术

该技术的主要材料是transwell小室，应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种细胞生物学方面的研究。

服务项目：细胞共培养；细胞趋化；细胞迁移；细胞侵袭。

服务流程：客户提供细胞；Transwell检测；提供结果报告单。

客户提供：实验用细胞。我司提供：结果图片；结果报告单。

1.6 细胞划痕

细胞划痕实验是将细胞培养在培养皿或平板上，待细胞融合后用细胞刮在中央区域画一条线，这条线内的细胞被机械力去除掉了，然后将细胞继续培养，观察细胞向无细胞的划痕区域迁移的情况，来判断细胞的迁移能力。

服务项目：细胞划痕实验。 服务流程：客户提供细胞；铺板、划痕及测量；提供结果报告单。

客户提供：实验用细胞。我司提供：结果图片；结果报告单。

1.7 稳定细胞株筛选

我司可利用带有荧光或抗生素抗性的表达载体包装的慢病毒，通过病毒感染细胞作单克隆筛选获得过表达或者抑制的稳定细胞株。

服务项目：慢病毒包装；稳定细胞株筛选；

服务流程：慢病毒表达载体构建；病毒包装；感染细胞；单克隆筛选。qPCR和Western Blot验证，提交结果报告单。

客户提供：细胞株；目的基因相关信息；目的蛋白抗体。

我司提供：稳定的单克隆细胞株2株；qPCR和Western Blot检测结果；结果报告单。

1.8 Sensor Reporter的构建与活性检测服务

1.8.1 miRNA荧光素酶报告检测：当miRNAs与靶基因的3’UTR结合后，主要抑制靶mRNA的翻译，可以用Western Blot检测靶蛋白的表达水平；也有部分表现为对靶mRNA的降解，可以用qRT-PCR 进行检测。但是这两种方法都不能有效说明是miRNAs直接作用的结果。直接的证据在于Sensor Reporter的构建与活性检测，用Promega特有的psiCHECH载体，对miRNAs与靶基因3’UTR的关系作出准确的判断。